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新闻 自闭症研究的最新进展。
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重复标记有助于揭示突触蛋白

通过/ 2021年1月12日
神经元连接处存在蛋白质。
高分辨率:多轮标记为研究人员提供了神经元连接处蛋白质的详细图像。

根据一项新的研究,一种新的显微镜技术提供了迄今为止最详细的观察脑组织小块中存在的单个蛋白质。

研究人员几乎在今天的2021年全球连接体神经科学学会。(摘要链接仅适用于注册的会议与会者。)

影像的内容突触长期以来,由于现有显微镜的能力有限,这种小而拥挤的神经元连接一直受到阻碍:标准光学显微镜的分辨率受到限制;在许多研究中,更强大的显微镜,如电子显微镜,无法捕捉用于识别蛋白质的彩色标记。

为了绕过这些障碍,研究人员开发了一种新方法,使他们能够在一个组织样本中重复标记多种蛋白质。他们把这一战术与扩张显微镜,通过增加组织体积来提高图像分辨率。这些技术一起提供了突触中存在的蛋白质的详细视图。

“有了这样的数据,我们可以开始研究蛋白质之间的高维关系,”并有可能识别出新的突触亚型,”他说玛格丽特·施罗德他是哈佛大学的一名研究生独到的冯Ed Boyden他在麻省理工学院展示了这项研究。

Schroeder和她的同事发现,该方法也与Cre重组酶兼容。这种酶可以用来测试基因突变对转基因小鼠的影响,包括一些转基因小鼠自闭症小鼠模型

标签,冲洗,重复:

在这项新研究中,Schroeder和她的同事首先在小鼠脑组织上使用了扩展显微镜。该小组于2015年首次开发了膨胀显微镜,它使用一种吸水凝胶来拉一张纸巾而不破坏细胞结构。组织膨胀会产生更多分子间的空间,提高图像的分辨率多出20倍。

然后,研究人员使用与特定蛋白质结合的抗体对扩张的组织进行染色。在对组织进行成像后,他们用洗涤剂和加热将这些抗体剥离,然后用新的抗体再次对组织进行不同蛋白质的染色。

Schroeder和她的同事证明他们可以重复这个过程至少四次,在保持图像强度的同时应用额外的染色轮。结果,他们发现他们可以在同一视野内对数十种蛋白质成像;目前的方法一次只能成像三到四种蛋白质。

由于他们获得了更多关于突触的数据,研究人员计划探索蛋白质是如何在这些区域聚集的。他们说,这些结果可能为突触的多样性和功能提供新的见解。

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